TINCION DE WRIGHT

Solución colorante poli cromática para la tinción diferencial de la mayoría de las estructuras de sangre así como algunos de sus parásitos, por el método de Wright. Uso exclusivo de diagnóstico in vitro.

REACTIVOS.

1.- Colorante de Wright.

2.- Buffer de Fosfato.

PROCEDIMIENTO.

1. Se procede a realizar un frotis sanguíneo por medio de punción venosa.
   
2. Colocar la placa con la extensión hacia arriba en una gradilla de tinción.
   
3. La extensión se cubre con 1-2 ml del colorante durante 3 o 4 minutos.
   
4. Agregar suavemente Buffer de Fosfatos en la misma cantidad que el colorante y mezclar soplando sobre la superficie pero evitando derrames. Dejar de 8 a 10 minutos hasta que aparezca una escarcha metálica.
   
5. Quitar el colorante con agua destilada en forma horizontal, luego tomando la placa en forma vertical, continúe el lavado hasta que haya desaparecido toda la coloración azul.
   
   
   
6. Secar al aire en la posición vertical sobre papel absorbente.

RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS.

INTRODUCCION.

El recuento diferencial de leucocitos consiste en reconocer y valorar las proporciones relativas de las distintas variedades de glóbulos blancos que se observan en el frotis teñido de sangre.

Al conocer la proporción de células sanguíneas que están presentes en el torrente sanguíno cualquier trastorno patológico que altere el sistema hematopoyético podría verse reflejado un cambio de la proporción de una especie celular. Para el recuento diferencial se tiene que observar un mínimo de 100 leucocitos.

Hay varios métodos de recuento diferencial de leucocitos pero el más utilizado es el de almena y en línea.

MATERIAL Y REACTIVOS.

.-Frotis sanguíneo teñido.

.-Microscopio.

.-Aceite de inmersión.

.-Un contador de células.

PROCEDIMIENTO.

1.  Se coloca el frotis en el microscopio y se enfoca.
   
2. Se le agrega una gota de aceite de inmersión y se observa con el objetivo de 100X
3.  Si el recuento se hace en línea se empieza en el borde del frotis hasta el otro borde  en línea paralela hasta contar 100 leucocitos.
4. Se van contando los mononucleares (monocitos y linfocitos) y los polimorfonucleares (neutrófilos, basófilos y eosinofilos) según su morfología.
   
5.  Se reportan en % (valor relativo) o en valor absoluto (mm3)

VALORES DE REFERENCIA.

	ADULTOS	NIÑOS
LINFOCITOS	20-55%	20-50%
MONOCITOS	2-6%	0-9%
EOSINOFILOS	1-5%	0-8%
BASOFILOS	0-1%	0-1%
NEUTROFILOS	45-70%	20-60%
BANDAS	0-5%	1-6%

Resultados:

LINFOCITOS: 40%

MONOCITOS: 3%

EOSINOFILOS: 2%

BASOFILOS: 0%

NEUTROFILOS: 58%

BANDAS: 4%

Conclusión

De acuerdo a como se haya realizado nuestra tinción y en base a los conocimientos previos que tengamos de la identificación de estructuras leucocitarias, podremos identificar con facilidad estos cuerpos, cuantificándolos y diferenciándolos para conocer el estado de salud del paciente y así contribuir al diagnóstico de posibles leucemias u otras enfermedades. En base a los resultados obtenidos y comparándolos con los valores de referencia podemos deducir que nuestro paciente se encuentra en condiciones normales